Serological mga pagsubok: uri, paggamit

Laboratory diagnosis ng halos lahat ng mga nakakahawang sakit ay batay sa pagtuklas ng dugo sa antibodies ng pasyente, na kung saan ay nagawa sa pamamagitan ng pathogen antigen, serological pamamaraan. Sila nagpunta sa medical practice sa huling bahagi ng ikalabinsiyam na - unang bahagi ng ikadalawampu siglo.

Ang pag-unlad ng agham ay nakatulong upang tukuyin ang antigenic istraktura ng microbes at chemical formula ng kanilang mga toxins. Ito ay posible upang lumikha ng hindi lamang therapeutic ngunit din diagnostic suwero. Ang mga ito ay nakuha sa pamamagitan ng pagbibigay attenuated pathogens hayop laboratoryo. Matapos ang ilang araw ng soaking kuneho dugo o daga inihanda produkto na ginagamit para sa pagkilala ng mga bakterya o ang kanilang mga toxins gamit serological mga pagsubok.

Ang panlabas na pagpapakita ng reaksyon na ito ay depende sa mga kondisyon ng pagbabalangkas nito at ang estado ng antigens dugo ng pasyente. Kung microbes ay hindi matutunaw particle, sila tumira, lysed, nakatirik o nakatali sa suwero. Kung ang antigens ay may kalutasan, ito ay lilitaw ang palatandaan ng neutralisasyon o pag-ulan.

aglutinasyon (PA)

Serological aglutinasyon pagsubok ay lubos na tiyak. Ito ay madali upang maisagawa at ay lubos na malinaw na upang mabilis na matuklasan ang pagkakaroon ng mga antigens sa mga pasyente suwero. Ito ay ginagamit para sa pagtatakda Vidal reaction (diyagnosis ng tipus at parataypoyd) at Weigl (tipus).

Ito ay batay sa isang tiyak na pakikipag-ugnayan sa pagitan ng tao antibodies (o agglutinins) at microbial mga cell (agglyutenogenami). Kasunod ng kanilang pakikipag-ugnayan ay nabuo particle na namuo. Ito ay isang positibong sign. Para sa pagtatakda ng reaksyon ay maaaring gamitin buhay o patay microbial ahente, fungi, protosowa, selula ng dugo at somatic cell.

Chemical reaksyon ay nahahati sa dalawang yugto:

1. Tukoy antibodies compound (AT) na may antigens (Ag).
2. Non-tiyak - ang pagtitiwalag ng conglomerates AG-AT, ibig sabihin, sa pormasyon ng agglutinate.

Reaksyon di-tuwiran aglutinasyon (TPHA)

Reaksyon na ito ay mas sensitibo kaysa sa nakaraang isa. Ito ay ginagamit para sa diagnosis ng mga sakit na sanhi ng bakterya, intracellular parasites, protosowa. Ito ay kaya tiyak na maaaring makakita kahit napakababang concentrations ng antibodies.

Para sa pagbabalangkas nito gamit pulang selula ng dugo purified tupa at pulang selyo ng dugo ng tao pretreated may antibodies o antigens (ito ay depende sa kung ano ang lab ay nais upang mahanap). Sa ilang mga kaso, human pulang selula ng dugo itinuturing na may immunoglobulins. Serologic tugon ng erythrocytes ay itinuturing na wasto kung precipitation niyaon naganap sa ibaba ng tube. Ang positibong reaksyon maaari naming sabihin kapag ang cell ay nakaayos sa hugis ng isang inverted payong, na sumasakop sa buong ibaba. Ang mga negatibong reaksyon ay nakapuntos kapag ang pulang selula ng dugo tumira sa anyo ng isang haligi o mga pindutan sa gitna ng ilalim.

precipitation reaksyon (RP)

Serological reaksyon ng ganitong uri maglingkod upang makilala ang mga lubos na maliit na particle antigens. Ito ay maaaring, halimbawa, protina (o bahagi nito), compounds ng mga protina na may lipids o carbohydrates, bahagi ng bakterya at ang kanilang mga toxins.

Sera para sa mga reaksyon ay nakuha sa pamamagitan ng artipisyal na infestation ng mga hayop, kadalasan rabbits. Sa ganitong paraan, maaari kang makakuha ng walang pasubali anumang precipitating suwero. Pagtatanghal ng dula serological pag-ulan katulad na mekanismo ng pagkilos sa aglutinasyon. Ang antibodies na nakapaloob sa suwero magbigkis sa antigens sa koloidal solusyon upang bumuo ng mga malalaking mga molecule ng protina, na kung saan ay idineposito sa ibaba ng tube o sa substrate (gel). Ang pamamaraan na ito ay itinuturing na mataas na tukoy at maaaring matagpuan kahit bakas na halaga ng mga sangkap.

Ginagamit upang mag-diagnose plague, tularemia, anthrax, meningitis at iba pang mga sakit. Gayundin kasangkot sa forensic pagsusuri.

Gel precipitation test

maaaring natupad serological pagsusuri hindi lamang sa isang likido daluyan, ngunit sa agarose gel. Ito ay tinatawag na nagkakalat ng paraan ng pag-ulan. Gamit ito, pag-aralan ang mga bahagi ng kumplikadong antigenic mixtures. Ang pamamaraan na ito ay batay sa mga chemotaxis ng antigens na antibodies, at vice versa. Ang gel ilipat sila patungo sa bawat isa sa iba't ibang mga bilis at pulong upang bumuo ng precipitation linya. Ang bawat linya - isang set ng mga K-SA.

Ang neutralisasyon exotoxin antitoxin (RN)

Antitoksiko suwero ay maaaring neutralisahin exotoxin na microorganisms makagawa. Batay sa data na ito at serological mga pagsubok. Microbiology ay gumagamit ng ang paraan na ito para sa titration ng sera, toxins at toxoids, pati na rin ang kanilang nakakagaling na aktibidad. Ang lakas ng neutralisasyon ng lason ay tinutukoy ng mga maginoo yunit - AE.

Dagdag pa rito, dahil sa reaksyon na ito ay maaaring matukoy ang species o mga uri na kabilang exotoxin. Ito ay ginagamit sa diagnosis ng tetano, dipterya botulism. maaaring isinasagawa pag-aaral out "sa glass", at sa isang gel.

lysis reaction (RL)

Ang immune suwero, na kung saan pumapasok sa katawan ng pasyente, may, bukod sa kanyang mga pangunahing pag-andar ng passive kaligtasan sa sakit, pantay at lytic properties. Ito ay may kakayahang dissolving microbial ahente, cellular at banyagang elemento virus sa pagpasok sa katawan ng pasyente. Depende sa pagtitiyak ng antibodies kasama sa serum ihiwalay bactericidin, cytolysins, spirohetoliziny, hemolysins at iba pa.

Ang mga tiyak na antibodies ay tinatawag na "pandagdag". Ito ay matatagpuan sa halos lahat ng likido sa katawan, ito ay may komplikadong istraktura ng protina at ito ay napaka-sensitibo sa temperatura pagtaas, liglig, acids at direktang liwanag ng araw. Ngunit sa pinatuyong estado ay magagawang upang mapanatili ang kanilang lytic aari ng hanggang sa anim na buwan.

Mayroong ilang mga uri ng serological pagsusuri ng ganitong uri:

- bacteriolysis;

- hemolysis.

Bacteriolysis ay isinasagawa gamit ang suwero ng dugo ng pasyente at mga tiyak na immune suwero na may live na mga mikrobyo. Kung, pagkatapos ay ang tagapagpananaliksik nakikita ang lysis ng bakterya, at ang tugon ay isasaalang-alang bilang isang sapat na bilang ng mga positibong pampuno ay naroroon sa dugo.

Ang ikalawang dugo serological Bilang tugon ay na ang suspensyon ng erythrocytes ginagamot pasyente suwero na naglalaman hemolysins, na kung saan ay aktibo lamang sa presensya ng isang partikular na papuri. Kung may isa, pagkatapos ay ang lab nanonood ng bisa ng pulang selula ng dugo. reaksyon na ito ay malawakang ginagamit sa mga modernong gamot upang matukoy ang titer ng pampuno (ibig sabihin, ang pinakamaliit na halaga makapupukaw lysis ng mga pulang selula ng dugo) sa suwero ng dugo at para sa produksyon ng mga pandagdag na nagbubuklod esse. Ito ay sa paraan na ito na isinasagawa serological reaksyon para sa syphilis - Wasserman.

pampuno pagkapirmi (RSK)

reaksyon na ito ay ginagamit upang mahanap suwero antibodies sa mga pasyente ng isang nakahahawang ahente pati na rin upang makilala ang maylikha ng kanyang antigenic istraktura.

Hanggang sa puntong ito namin na inilarawan sa isang simpleng serological mga pagsubok. RAC itinuturing na mahirap na reaksyon, dahil ito ay nakikipag-ugnayan hindi dalawa, ngunit tatlong elemento: isang antibody, isang antigen at mapupunan. Nito kakanyahan ay namamalagi sa ang katunayan na ang pakikipag-ugnayan sa pagitan ng mga antibody at antigen ay nangyayari lamang sa presensya ng protina purihin na kung saan ay adsorbed sa ibabaw ng nabuo complex K-SA.

Ang kanilang mga sarili antigens matapos karagdagan ng pampuno, napapailalim sa mga makabuluhang pagbabago, na nagpapahiwatig sa kalidad ng mga reaksyon. Ito ay maaaring lysis, hemolysis, immobilization, bactericidal o bacteriostatic epekto.

Ang reaksyon mismo ay nangyayari sa dalawang phases:

1. Ang pagbuo ng antibody-antigen, na kung saan ay hindi biswal kapansin-pansin na tagapagpananaliksik.
2. Ang pagbabago ng antigen sa ilalim ng pagkilos ng pampuno. Phase na ito ay karaniwang ay maaaring traced sa mga mata lamang. Kung ang visual na tugon ay hindi makikita, pagkatapos ay gamitin ang mga karagdagang tagapagpahiwatig ng sistema na nagbibigay-daan sa tiktikan pagbabago.

indicator ng sistema

Reaksyon na ito ay batay sa mga umiiral ng pampuno. Ang test tubes oras pagkatapos ng pagtatakda RSK idinagdag purified tupa erythrocytes at suwero hemolytic hindi naglalaman ng pampuno. Kung ang tubo ay naiwang nakatali pampuno, ito ay sumali sa complex N-SA nabuo sa pagitan ng mga cell tupa dugo at hemolysin, at aking paaagusin ang kanilang bisa. Mangangahulugan ito na ang DGC ay negatibo. Kung pulang selyo ng dugo ay nanatiling buo, pagkatapos, nang naaayon, ang reaksyon ay positibo.

hemagglutination (RHA)

Mayroong dalawang sa panimula iba't ibang hemagglutination. Isa sa mga ito - serological, ito ay ginagamit para sa pagtukoy ng mga grupo ng dugo. Sa kasong ito erythrocytes makipag-ugnayan sa antibodies.

At ang pangalawang reaksyon ay hindi na may kaugnayan sa serological, dahil pulang selula ng dugo reaksyon sa hemagglutinin nagawa sa pamamagitan ng mga virus. Dahil ang bawat eksayter ay gumaganap lamang sa mga tiyak na erythrocytes (manok, tupa, unggoy), maaari naming ipagpalagay na reaksyon na ito makitid tiyak.

I-clear ang positibo o negatibong tugon, ito ay posible para sa mga lokasyon ng mga selula ng dugo sa ilalim ng tube. Kung malaman nila kahawig ng isang inverted payong, at pagkatapos ay ang nais na virus ay naroroon sa dugo ng pasyente. At kung ang lahat ng mga pulang selula ng dugo nabuo tulad ng isang haligi coin, walang mga hindi kilalang pathogens.

Reaksiyon ng hemagglutination pagsugpo (HAI)

Ito mataas na tukoy na reaksyon, na kung saan ay nagbibigay-daan upang maitaguyod ang porma, uri ng virus o ang pagkakaroon ng mga tiyak na antibodies sa suwero ng dugo ng pasyente.

Nito kakanyahan ay namamalagi sa ang katunayan na ang mga antibodies idinagdag sa tube na naglalaman ng mga materyal sa pagsusuri, pinipigilan ang pagtitiwalag ng antigens sa erythrocytes, at dahil doon pagpapahinto hemagglutination. Ito ay isang mapaghambing indikasyon ng pagkakaroon ng mga tukoy na antigens dugo sa isang partikular na ninanais na virus.

Reaksyon immunofluorescence (RIF)

reaksyon ay batay sa ang kakayahan upang makilala ang mga complexes sa AT-AH fluorescent mikroskopya pagkatapos ng paggamot flyuorohromnymi dyes. Ang pamamaraan na ito ay simple upang gamitin, ay hindi nangangailangan ng paghihiwalay ng purong kultura at tumatagal ng maliit na oras. Ito ay lubhang kailangan para sa mabilis na diagnosis ng mga nakakahawang sakit.

Sa pagsasanay, ang mga serological mga pagsubok ay nahahati sa dalawang kategorya: direkta at hindi direktang.

Direct RIF ginawa antigen na dati naproseso fluorescent suwero. At Indirect ay na ang gamot ay unang itinuturing na may maginoo diagnosticum na binubuo ng antibodies sa nais na antigen at pagkatapos ay muling inilapat fluorescent patis ng gatas, na kung saan ay tiyak sa ang mga protina ng complex K-AT, at microbial mga cell maging nakikita sa pamamagitan ng mikroskopya.